3.19.31.73
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KCI 등재 SCOPUS
Mortierella sp. 유래 α-Galactosidase의 기질특이성
Substrate Specificities of α-Galactosidase from Mortierella sp
박귀근 ( Gwi Gun Park )
UCI I410-ECN-0102-2012-570-002189284

Mortierella sp. 유래 효소 정제는 CM-sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-100 column에 의해 수행하여 SDS-전기영동에서 단일밴드를 확인하였고 분자량은 57kDa로 결정되었다. melibiose, raffinose 및 stachyose의 세 종류의 기질에 대한 특이성에서는 Mortierella sp. 유래 정제 α-galactosidase는 세 종류 기질의 비환원말단에 위치하고 있는 galactose를 모두 유리하는 특이성이 있음을 확인하였다. Bacillus sp. 유래의 Gal³Man₄에 대해서 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 반응말기에서는 galactose, mannotetraose 그리고 분해되지 않고 일부 남아있는 Gal³Man₄의 spot이 출현된 반면, 중합도 7의 Gal2,3Man5에 대해서는 반응초기부터 말기까지 전혀 특이성이 없음을 시사하였다. Trichoderma harzianum 유래의 Gal²Man₃에 대해서는 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 일부 galactose와 mannotriose spot이 출현되고 있는 반면, 중합도 7의 Gal²Man6에 대해서는 Bacillus sp. 유래의 중합도 7의 Gal2,3Man5와 동일하게 galactose를 절단하는 능력이 없는 특이성을 보이고 있다. Xylogone sphaerospora 유래의 Gal²Man₃는 Trichoderma harzianum 유래의 중합도 4와 동일한 구조로서 가수분해 시간 경과에 따른 반응말기에서 역시 galactose, mannotriose 및 잔존하는 Gal²Man₃ spot이 출현하고 있는 반면 중합도 6인 Gal²Man5에 대해서는 mannopentaose의 환원말단부터 2번 mannose에 결합하고 있는 galactose에 대해서는 역시 특이성을 나타내지 않아 반응 초기부터 말기까지 가수분해 pattern에 대한 변화를 보이지 않고 있다.

α-Galactosidase was purified from a culture filtrate of Mortierella sp. by CM-sephadex C-50, and subsequent Sephadex G-100 column chromatography. The final preparation thus obtained showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 56 kDa. Gal³Man₄ (6³-mono-O-α-D-galactopyranosyl-4-O-β-Dmannotetraose), Gal2,3Man5 (6(2,3)-di-O-α-D-galactopyranosyl-4-O-β-D-mannopentaose), Gal²Man₃ (6²-mono-O-α-D-galactopyranosyl-4-O-β-D-mannotriose), Gal²Man6 (6²-mono-O-α-D-galactopyranosyl-4-O-β-D-mannohexaose) and Gal²Man5 (6²-mono-O-α-D-galactopyranosyl-4-O-β-D-mannopentaose), prepared from 3 types of microbial β-mannnanase, were used as substrates. Gal³Man₄ and Gal²Man₃ had a stubbed α-galactosyl residue on the 2nd and 3rd mannose from the reducing end of mannotetraose and mannotriose, thus α-galactosidase showed a preference for stubbed α-galactosyl residue. α-Galactosidase hydrolyzed Gal³Man₄ more rapidly than Gal²Man₃. However, α-galactosidase hardly acted on Gal2,3Man5, Gal²Man6 or Gal²Man5. The enzyme hydrolyzed melibiose to galactose and glucose, raffinose to galactose and sucrose, and also stachyose to galactose and raffinose.

[자료제공 : 네이버학술정보]
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