말굽버섯의 열수추출물에서 얻은 조다당체인 MFKF-CP를 분리, 정제하기 위하여 DEAE-sepharose FF 및 ConcanavalinAsepharose 4B를 이용한 두 차례의 연속적인 chromatography 를 수행하였다. DEAE-sepharose FF에서는 3종류의 다당체 (MFKF-NP, MFKF-AP1, MFKF-AP2)를 분리하였는데, 그 중에서 MFKF-AP1이 50 μg/ml 농도에서 70% 이상의 높은 항보체 활성을 보였다. 이어서 ConcanavalinA-sepharose 4B 칼럼을 이용해 MFKF-AP1과 MFKF-AP2 다당체로부터 각각 MFKF-AP1α, β와 MFKF-AP2α, β 다당체를 분리하였다. 그 중에서 MFKF-AP1β가 20 μg/ml 농도에서 70% 이상의 가장 우수한 항보체 활성을 나타내었고 그 활성 순서는 MFKF-AP1β > MFKF-AP1α > MFKF-AP2α > MFKFAP2β> MFKF-NP > PKS이었다. 또한, Mg++과 Ca++ 이온이 제거되거나 첨가된 상태에서의 항보체 활성 실험을 통해 말굽버섯의 주 항보체 다당체인 MFKF-AP1β는 고전경로 (classical pathway)와 대체경로(alternative pathway) 모두를 경유하여 활성을 나타내고 있음을 확인하였다. Gas chromatography에 의한 구성당 조성 분석에서는 중성다당체인 MFKF-NP를 제외하고 나머지 4종의 다당체가 xylose를 약 70-99%의 높은 비율로 함유하고 있으며 특히 주요 항보체 다당체인 MFKF-AP1β는 xylose를 99% 함유하고 glucose (0.24%) 및 arabinose (0.66%)를 미량 함유하고 있는 매우 특이한 homoxylan이었다. 또한, MFKF-AP1β의 분자량을 HPLC로 분석한 결과, 약 12,000 정도인 것으로 추정되었다.

The five anti-complementary polysaccharides (MFKF-NP, MFKF-AP1α, β, and MFKF-AP2α, β) were separated from hot water extracts of fruiting bodies of Fomes fomentarius by two subsequent column chromatography using DEAE-sepharose FF and Concanavalin A-sepharose 4B. The order of anti-complementary activity was MFKF-AP1β > MFKF-AP1α > MFKF-AP2α > MFKF-AP2β > MFKF-NP > Polysaccharide Krestine (PSK). Especially, MFKF-AP1β among those showed the most excellent anti-complementary activity (70% of ITCH50 value at 20 μg/ml). The monosaccharide composition analysis by gas chromatography indicates that MFKF-AP1α and β are a kind of homoxylan consisted mainly of xylose above 97%. Molecular weight of MFKF-AP1β, major anti-complementary polysaccharide, was estimated to be about 12,000 by high performance liquid chromatography (HPLC). After the incubation of the serum with MFKF-AP1β in the presence or absence of Mg++ and Ca++ ions, its anti-complementary activity was investigated. This result indicated that MFKF-AP1β seems to be activator both on the classical and the alternative pathway of complement activation.