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한국미생물·생명공학회지검색

Microbiology and Biotechnology Letters


  • - 주제 : 자연과학분야 > 생물
  • - 성격 : 학술지
  • - 간기: 계간
  • - 국내 등재 : KCI 등재
  • - 해외 등재 : - / SCOPUS
  • - ISSN : 1598-642x
  • - 간행물명 변경 사항 : 산업미생물학회지(~2001)→한국미생물·생명공학회지(2002~)
논문제목
수록 범위 : 40권 4호 (2012)

부안갯벌 생태계 복원을 위한 칠면초와 해홍나물의 내생진균류에 대한 유전학적 다양성 분석

유영현 ( Young Hyun You ) , 윤혁준 ( Hyeok Jun Yoon ) , 서영교 ( Yeong Gyo Seo ) , 김미애 ( Mi Ae Kim ) , 신재호 ( Jae Ho Shin ) , 이인중 ( In Jung Lee ) , 추연식 ( Yeon Sik Choo ) , 김종국 ( Jong Guk Kim )
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부안갯벌에서 채집된 염생식물 칠면초와 해홍나물의 뿌리로부터 84종의 내생진균을 분리 및 동정하였다. 염생식물 샘플은 칠면초와 해홍나물이 부안갯벌로부터 분리되었다. 모든 내생진균류들은 ITS1, 5.8s와 ITS2를 포함하는 ITS영역의 서열에 의해 분석되었다. 내생진균류들은 Pleosporales(45%), Eurotiales (27%), Incertae sedis (11%), Dothideales(6%), Capnodiales (5%), Hypocreales (5%), 및 Agaricales(1%)에 해당하는 것을 확인하였다. 내생진균류는 자낭균문과 담자균문의 Alternaria속, Ascomycota속, Aspergillus속, Aureobasidium속, Cladosporium속, Eupenicillium속, Fusarium속, Gibberella속, Hocrea속, Lewia속, Macrophoma속, Penicillium속, Peyronellaea속, Phoma속, Pleospora속, Pleosporales속, Pseudeurotium속, Schizophyllum속, 그리고 Talaromyces속이 포함되는 것을 확인하였다. 그리고 alternaria(21%)와 Penicillium (13%)이 우점종인 것을 확인하였다. 본 연구에서는 칠면초와 해홍나물로부터 내생진균을 분리한 결과 Pleosporales 목과 Eurotiales 목의 Alternaria (21%)와 Penicillium (13%)이 가장 많이 분포하는 것으로 나타났다.

사찰의 된장에서 분리된 Bacillus Licheniformis YB-1234의 내열성 α-Amyalse

이은지 ( Eun Ji Lee ) , 윤기홍 ( Ki Hong Yoon )
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국내 사찰에서 제조된 된장으로부터 내열성 α-amylase 생산균으로 분리된 YB-1234는 형태적 특성, 생화학적 성질 및 16S rRNA 유전자 염기서열에 근거하여 Bacillus licheniformis로 동정되었다. B. licheniformis YB-1234의 α-amylase 유전자를 클로닝하여 그 염기서열을 결정하였으며 그로부터 유추된 α-amylase의 아미노산 서열은 glycosyl hydrolase family 13에 속하는 B. licheniformis의 내열성 α-amylases와 매우 높은 상동성을 보였다. α-Aamylase 유전자를 함유한 재조합 대장균과 B. licheniformis에 의해 각각 생산된 α-amylase는 pH 6.0에서 최대활성을 보였으나, 최적 반응온도는 약간의 차이가 있었다. 또한 B. licheniformis로부터 α-amylase는 재조합 대장균에서 생산된 효소보다 열안정성이 매우 높았다. 이들 효소에 의한 maltotetraose와 maltohexaose의 주된 가수분해산물로는 glucose, maltose 및 maltotriose가 관찰되었다.

Isolation and Characterization of a Feather Degrading Alkalophilic Streptomyces sp. TBG-S13A5 and its Keratinolytic Properties

( Indhuja Selvaraj ) , ( Sugathan Shiburaj ) , ( Nediyaparambu Sukumaran Pradeep ) , ( Vaidyanathan Thankamani ) , ( Teruvath Koshy Abraham )
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Keratinases are of particular interest because of their action on insoluble keratins and generally on a broad range of protein substrates. Alkalophilic and neutrophilic actinomycete strains isolated from different soil samples, rich in keratinaceous substances were screened for keratinolytic activity. An alkalophilic isolate, TBG-S13A5, was found to possess good keratinolytic activity and was able to utilize feather as the sole carbon and nitrogen source. TBG-S13A5 exhibited an off-white aerial mass color with a rectus-flexibilis type of spore chain. The morphological, microscopical and biochemical characters were comparable with that of Streptomyces albidoflavus. Fatty acid methyl ester profiling (FAME) and 16S rDNA sequence analysis confirmed its identity as a strain of S. albidoflavus. Under submerged fermentation conditions, maximum protease production was recorded on the 5th day of incubation at 30℃, using basal broth of pH 9.0 with 0.25% (w/v) white chicken feather. This strain could affect feather degradation when the initial pH was 8 and above and maximum protease production was recorded when the initial pH was around 10.5. The effectiveness of the crude enzyme in destaining and leather dehairing were also demonstrated.

아토피유발인자 억제효과를 증대하는 Lactococcus Lactis의 배양방법

조유란 ( Yu Ran Jo ) , 강상모 ( Sang Mo Kang )
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유세포 형광분석에 의한 유산균의 면역증진 효과와 황색포도상구균에 대한 유산균의 항균활성을 확인하여 항아토피 기능성이 있는 유산균을 탐색하고 그 배양법을 검토하였다. T cell에서 CD4+/CD25+/foxp3+ 증가는 Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis subsp. lactis (Lc. lactis)의 순으로 면역증진효과를 보였고, 황색포도상구균에 대한 항균력은 Lc. lactis, Lb. plantarum의 순으로 나타냈다. Lc.lactis 배양액 첨가배지에 Lb. plantarum을 배양한 실험에서는 항균력의 증가가 없었으나 Lb. plantarum 배양액 첨가배지에 Lc. lactis를 배양한 실험에서 황색포도상구균의 항균활성 증대가 나타났다. 항균력을 증가시키는 유산균 첨가배지법의 최적조건은 Lb. plantarum 배양상층액 10%를 첨가하고 가열살균한 배지에서의 Lc. lactis 배양으로 나타났다. 이때 유산균의 항균역가는 Lc. lactis 순수배양 시보다 대수기 말기에 급격히 증가하여, 황색포도상구균의 증식 억제력이 1.29배 높아졌다.

Rhizopus oryzae N174를 이용한 액체종국 저장조건에 따른 밀누룩의 품질특성

최정실 ( Jeong Sil Choi ) , 정석태 ( Seok Tae Jung ) , 최지호 ( Ji Ho Choi ) , 최한석 ( Han Seok Choi ) , 백성열 ( Seong Yeol Baek ) , 여수환 ( Soo Hwan Yeo )
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거미줄곰팡이인 R. oryzae N174를 이용한 액체종국 배양기술을 개발하기 위해, 밀기울 농도별(0, 5, 10, 15 및 20%)로 액체종국을 제조하여 이들의 품질 특성을 조사하였다. 배지에 밀기울 첨가량이 많을수록 균사체량이 많아졌을 뿐 아니라 산도, 아미노산도가 증가하는 특성을 보였다. 또한, 밀기울을 5% 첨가한 군에서 α-amylase와 glucoamylase의 활성도가 높았으며 acidic protease의 경우에는 15% 밀기울 첨가 배지에서 활성도가 높았다. 배양시간 별(0, 24, 48, 72 및 96 hrs) 효소 활성은 48~72시간에 효소활성이 가장 높은 것으로 나타났다. R. oryzae N174 액체종국 최적조건은 5~15% 밀기울 배지에서 48~72시간 배양이 최적조건이었다. 이를 토대로 밀기울 액체종국을 제조하여 저장온도와 저장기간을 달리하여 저장한 후, 밀누룩 제조시 종국으로서 적합한지를 구명하고자 하였다. 제조된 밀누룩의 효소 활성뿐만 아니라 pH, 산도 및 환원당 함량을 비교 분석한 결과, 저장온도와 상관없이 하루 정도 저장한 액체종국을 사용하여 만든 밀누룩에서 높은 수치를 보였다. 저장조건에 따른 형태학적 변화를 살펴본 결과, 저장된 액체종국에서 균사체의 생육과 포자의 생성유무에 따라 밀누룩의 효소 활성에 영향을 미칠 것이라는 예상과는 달리 각 효소의 활성과 균사체의 생장, 포자의 생성과는 큰 차이가 보이지 않았다.

시판 막걸리의 이화학적 특성과 젖산균 함량 및 생리기능성

김영헌 ( Young Hun Kim ) , 민진홍 ( Jin Hong Min ) , 강민구 ( Min Gu Kang ) , 김재호 ( Jae Ho Kim ) , 안병학 ( Byung Hak Ahn ) , 김하근 ( Ha Kun Kim ) , 이종수 ( Jong Soo Lee )
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본 연구는 우리나라 막걸리의 우수성을 발굴하고자 60종의 시판 생 막걸리와 저온살균 막걸리를 수집하여 이들의 주요 이화학적 성질과 젖산균 및 항고혈압활성 등의 생리기능성을 조사하였다. 생 막걸리의 에탄올 함량은 3.6%~9.6% 이 었고 이들의 잔당 함량은 0.20%에서 4.52%, 아미노태질소 함량은 3.50~101.9 mg%로 다양하였다. 저온살균 막걸리의 경우 에탄올 함량은 4.0%~7.0%로 생 막걸리와 비슷하였으나 잔당함량은 0.98%~7.57%로 생 막걸리보다 높았다. 또한 시판 생 막걸리의 젖산균 생균수는 평균 2.0×108 CFU/mL이었다. 여러가지 생리기능성 중 시판 EDS-14 생 막걸리와 PWR-12 저온살균 막걸리의 항고혈압성 안지오텐신 전환효소 저해활성이 각각 89.0%와 87.0%로 매우 높았으나 여타의 생리기능성은 30% 미만으로 낮았다. 또한 β-Glucan 함량은 생 막걸리와 저온살균 막걸리가 각각 건조고형물 g당평균 14.1%와 14.6%을 보였다.

북극 지의류로부터 분리한 미생물 배양 추출액의 항산화 활성

김미경 ( Mi Kyeong Kim ) , 박현 ( Hyun Park ) , 오태진 ( Tae Jin Oh )
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지의류는 곰팡이, 조류 및 남조균류의 공생체이다. 본 연구팀은 최근 북극 지의류로부터 분리한 몇몇 미생물 종의 항산화 활성에 대하여 연구하였고, 그들의 높은 항산화 활성을 확인하였다. 본 연구에서는 Cladonia sp., Sterocaulon sp., Umbilicaria sp. 및 Cetraria sp. 총 4종류의 지의류로부터 5종의 미생물을 새롭게 분리하였고 배양 후, 다양한 용매 추출법으로 그들의 항산화능을 조사하였다. DPPH와 ABTS 자유 라디컬 소거능 측정법 및 FRAP 분석 등을 수행하였다. 또한 총 폴리페놀함량과 총플라보노이드 함량 분석 역시 수행하였다. 지의류 유래 미생물 배양 추출액 중, Burkholderia sordidicola S5-B(T) 유사 미생물 종의 에틸아세테이트 추출액은 DPPH 분석에서 대조군인 아스코르빈산 (51.3%)에 비해 72.9%로 높은 항산화 활성을 보였을 뿐만 아니라, 높은 플라보노이드와 폴리페놀 함량을 나타내었다. 결과적으로, 이러한 지의류 유래 미생물 종들은 잠재적으로 천연 항산화제의 원천소재로서 이용가능할 것이다.
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동물세포배양 유래 생물의약품 생산 공정에서 다양한 외래성 바이러스가 오염된 사례가 있기 때문에 바이러스 안전성 보증을 위한 바이러스 검출시험이 필수적이다. Reovirus (Reo), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus (BPIV)는 동물 세포주와 동물 세포 배양 공정에 오염되는 대표적인 RNA 바이러스이다. 세포배양 유래 생물의약품의 안전성을 확보하기 위해, 세포주, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 Multiplex Reverse Transcription (RT)-PCR 시험법을 확립하였다. Reo, BVDV, BPIV에 특이적인 primer를 선별하였으며, multiplex RT-PCR 시험법을 최적화하였다. Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 multiplex RT-PCR 시험법의 민감도는 각각 7.76×102 TCID50/ml, 7.44×101 TCID50/ml, 6.75×101 TCID50/ml이었다. 확립된 multiplex RT-PCR을 생물의약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인하기 위하여 인위적으로 각 바이러스를 오염시킨 CHO 세포에서 검출 시험을 실시한 결과 각 바이러스를 감염시킨 CHO 세포와 세포배양 상청액에서 각 바이러스를 검출할 수 있었다. 위와 같은 결과에서 확립된 multiplex RT-PCR시험법은 세포주, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 특이성과 민감성이 우수한 시험법임을 확인하였다.

Saccharomyces cerevisiae와 Pichia pastoris에서 Bovine Pancreatic Deoxyribonuclease I의 과발현과 특성

조은수 ( Eun Soo Cho ) , 김정환 ( Jeong Hwan Kim ) , 윤기홍 ( Ki Hong Yoon ) , 김연희 ( Yeon Hee Kim ) , 남수완 ( Soo Wan Nam )
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본 연구에서는 S. cerevisiae와 P. pastoris에서 bovine pancreatic (bp-) DNase I의 과발현과 재조합 DNase I의 특성을 조사하였다. bp-DNase I 유전자는 GAL10 promoter, MFα, GAL7 terminator 사이에 삽입하여 재조합 plasmid인 pGAL-MFα-DNaseI (6.4 kb)를 구축하였다. 그리고 bp-DNase I 유전자를 AOX1 promoter, MFα, AOX1 terminator에 삽입하여 재조합 plasmid인 pPEXI (8.8 kb)를 구축하였다. 재조합 plasmid인 pGAL-MFα-DNaseI과 pPEXI를 각각 S. cerevisiae와 P. pastoris 숙주세포에 형질전환시켰다. 형질전환된 효모세포들을 galactose와 methanol 배지에서 30oC, 48시간 배양하면 bp-DNase I은 대부분이 배양 상등액으로 과발현되었다. P. pastoris 형질전환체는 배양 상등액에서 45.5 unit/mL의 DNase I 활성을 보였으며, 반면에 S.cerevisiae 형질전환체는 37.7 unit/mL의 DNase I 활성을 보였다. 또한 DNA 분해 특성을 조사한 결과, P. pastoris 재조합 DNase I으로 기질 DNA(calf thymus)를 처리하였을 때 1분 이내 DNA가 분해되는 것을 확인할 수 있었으며 이는 상업용 bp-DNase I과 S. cerevisiae 재조합 DNase I으로 처리했을 때보다 빠른 분해 패턴을 보였다.

Xanthan Gum Production from Hydrolyzed Rice Bran as a Carbon Source by Xanthomonas spp

( Demirci Ahmet Sukru ) , ( Muhammet Arici ) , ( Tuncay Gumusc )
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The aim of this study was to utilize rice bran, the main waste product of paddy processing, in xanthan gum production by Xanthomonas campestris fermentation. Deffated rice bran was enzymatically hydrolyzed using cellulase, gluco-amylase, alpha-amylase and xylanase at various pHs and temperatures within 0-12 h. The highest sugar content reached at 35oC, pH 5.5 in 6 h with 41.66%. The enzymatic hydrolysate was used as the carbon source for xanthan gum production by X. campestris NRRL B-1459 and X. campestris pv. campestris. The highest productivities obtained were 21.87 and 17.10 g/L, respectively. Viscosity measurement for the obtained xanthan gums and commercial gum was carried out in gum solutions at various pHs and temperatures. The highest viscosity was reached with 1% gum solutions at 20oC and pH 5.5 for all gums with viscosity values of 470, 131 and 138 mPa sec, respectively. This work has provided relevant scientific information about the use of rice bran, an abundant agroindustrial residue, to produce xanthan gum.
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