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> 대한소아감염학회 > Pediatric Infection and Vaccine > 23권 3호

소아에서 폐렴구균 집락률 측정을 위해 비인두 흡인 물의 총 RNA를 이용한 실시간 중합효소 연쇄반응법

Real-time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction Using Total RNA Extracted from Nasopharyngeal Aspirates for Detection of Pneumococcal Carriage in Children

김영광 ( Young Kwang Kim ) , 이경훈 ( Kyoung Hoon Lee ) , 윤기욱 ( Ki Wook Yun ) , 이미경 ( Mi Kyung Lee ) , 임인석 ( In Seok Lim )

- 발행기관 : 대한소아감염학회

- 발행년도 : 2016

- 간행물 : Pediatric Infection and Vaccine, 23권 3호

- 페이지 : pp.194-201 ( 총 8 페이지 )


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논문제목
초록(한국어)
목적: 폐렴구균은 주요 비인두 상재균으로, 주위 조직을 침범하여 침습성 감염을 일으킬 수 있어 보균 율에 대한 감시가 중요하다. 본 연구에서는 임상에서 비인두 흡인물로부터 추출하고 남은 RNA를 이용 하여 폐렴구균을 확인할 수 있는 실시간 중합효소 연쇄반응(real-time reverse transcription poly-merase chain reaction [RT-PCR])법을 구축하고, 보균율 측정에 있어서의 정확성과 이점을 확인하고자 하였다. 방법: 2014년 9월부터 10월까지 중앙대학교병원에 입원하여 호흡기 바이러스 RT-PCR 검사를 시행 받은 18세 이하의 소아들로부터 비인두 흡인물을 채취하였다. 먼저 배양법과 genomic DNA (gDNA) 를 이용한 real-time PCR을 시행하여 폐렴구균 검출률의 정확성을 확인하였다. 이 중 처음 20개의 검체 를 이용하여, 고전적인 배양법과 gDNA를 이용한 real-time PCR, 그리고 RNA를 이용한 real-time RT-PCR법을 시행하고 이를 비교 분석하였다. 결과: 총 157개의 검체에서 시행한 real-time PCR 검사는 기존의 배양검사와 일치율이 0.922 (P<0.01, Fisher exact test)로 매우 높았다. 배양검사에서 음성인 133개의 검체는 real-time PCR에서도 모두 음성을 보였다. 24개의 배양 양성 검체 중 21개의 검체는 real-time PCR에서도 양성이었지만, 나머지 검체는 음성 결과를 보였다. 20개의 검체에서 시행한 real-time RT-PCR 검사는 1개 검체를 제외 하고 배양법 및 real-time PCR과 결과가 일치하였다. 한편, 배양법을 시행하고 결과를 확인하기까지 는 총 26.5시간, real-time RT-PCR 검사에는 총 4.5시간이 소요되었다. 결론: 본 연구는 비인두 집락균 확인을 위한 real-time RT-PCR법의 확립과, 폐렴구균 보균율 측정에 있어서의 real-time RT-PCR 검사의 정확성 및 편의성을 보여주었다. Real-time RT-PCR 검사법 은 주요 세균들의 보균율 연구에 있어서 시간과 노력을 줄일 수 있는 좋은 방법이며, 폐렴구균의 역학 자료 수집에 큰 도움이 될 것으로 기대한다.
초록(외국어)
Purpose: Monitoring pneumococcal carriage rates is important. We developed and evaluated the accuracy of a real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) protocol for the detection of Streptococcus pneumoniae . Methods: In October 2014, 157 nasopharyngeal aspirates were collected from patients aged <18 years admitted to Chung-Ang University Hospital. We developed and evaluated a real-time PCR method for detecting S. pneumoniae by comparing culture findings with the results of the real-time PCR using genomic DNA (gDNA). Of 157 samples, 20 specimens were analyzed in order to compare the results of cultures, real-time PCR, and real-time RT-PCR. Results: The concordance rate between culture findings and the results of real-time PCR was 0.922 (P <0.01, Fisher exact test). The 133 culture-negative samples were confirmed to be negative for S. pneumoniae using real-time PCR. Of the remaining 24 culture-positive samples, 21 were identified as S. pneumonia -positive using real-time PCR. The results of real-time RT-PCR and real-time PCR from 20 specimens were consistent with culture findings for all S. pneumoniae -positive samples except one. Culture and real-time RT-PCR required 26.5 and 4.5 hours to perform, respectively. Conclusions: This study established a real-time RT-PCR method for the detection of pneumococcal carriage in the nasopharynx. Real-time RT-PCR is an accurate, convenient, and time-saving method; therefore, it may be useful for collecting epidemiologic data regarding pneumococcal carriage in children.

논문정보
  • - 주제 : 의약학분야 > 소아과학
  • - 발행기관 : 대한소아감염학회
  • - 간행물 : Pediatric Infection and Vaccine, 23권 3호
  • - 발행년도 : 2016
  • - 페이지 : pp.194-201 ( 총 8 페이지 )
  • - UCI(KEPA) : I410-ECN-0102-2018-500-000247245
저널정보
  • - 주제 : 의약학분야 > 소아과학
  • - 성격 : 학술지
  • - 간기 : 연3회
  • - 국내 등재 : KCI 등재
  • - 해외 등재 : - / SCOPUS
  • - ISSN : 2384-1079
  • - 수록범위 : 1994–2021
  • - 수록 논문수 : 753